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黑枸杞組培育苗技術的研究

黑枸杞組培育苗技術的研究

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黑枸杞屬茄科枸杞屬,是一種具有重要藥用保健價值的棘刺灌木,野生資源多散布于柴達木盆地的格爾木、德令哈、都蘭等地區的戈壁灘上。黑枸杞的漿果具有良好的藥用價值和保健價值,經測定,黑枸杞果實中的總糖含量為6.9%,總酸含量為0.74%。此外黑枸杞中還檢測出了人體所必須...

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黑枸杞屬茄科枸杞屬,是一種具有重要藥用保健價值的棘刺灌木,野生資源多散布于柴達木盆地的格爾木、德令哈、都蘭等地區的戈壁灘上。黑枸杞的漿果具有良好的藥用價值和保健價值,經測定,黑枸杞果實中的總糖含量為6.9%,總酸含量為0.74%。此外黑枸杞中還檢測出了人體所必須的17種氨基酸,以及豐富的微量元素。據中醫文獻報道,黑枸杞味甘、性平,具有抗衰老、清心熱,改善睡眠、美容養顏等眾多作用。隨著人們對其保健價值研究的深入,近年來黑枸杞越來越受到廣大消費者的青睞,栽培面積也迅速擴大。為了盡快培育出大量遺傳性狀完全一致的黑枸杞優良種苗,我們研究了黑枸杞組培育苗技術,研究結果介紹如下:

1 材料與方法

1.1 試驗材料

6月份,取黑枸杞當年萌發的新枝腋芽為外植體。

1.2 外植體消毒

剪取生長健壯的1年生黑枸杞枝條,在室內除去葉片后剪成約8 cm長的莖段,用洗滌靈水輕輕洗刷表面,注意不要破壞腋芽,洗刷完成后置于流動水下沖洗干凈,然后在無菌條件下進行以下操作:(1)用75%酒精浸泡30s,用無菌水沖洗2遍;(2)用0.1%升汞溶液浸泡8min,用無菌水沖洗3遍后備用。

1.3 培養條件

外植體的腋芽誘導、增殖培養和生根培養都在培養室內進行,室內溫度白天控制在25±2℃,夜間溫度為23±2℃,光照時間為16 h/d,光強2000~2500 lx。誘導培養、增殖培養階段以MS為基本培養基,加入35.0g/L蔗糖、8.0g/L瓊脂、pH值為5.6~5.8。生根培養階段以1/2MS為基本培養基,其他條件不變。

1.4 誘導培養試驗

以MS為基本培養基,添加不同質量濃度的激素(BA、IBA及NAA)配制12個配方的誘導培養基(表1)。在無菌環境中將消毒后的外植體切取腋芽,接種于誘導培養基上,每個配方接種50瓶,每瓶1個外植體,20d后統計其萌芽率,40d后統計腋芽生長高度。

表1 誘導培養基不同激素濃度配比表 mg·L-1


1.5 增殖培養試驗

待腋芽長到1.0cm以上時,將其從基部剪開,剪成1.0~2.0cm的單株小芽,轉接到以MS為基本培養基,添加不同質量濃度的激素(BA、IBA)配制的9個配方的增殖培養基上(表2)。每個組合接種50瓶,每瓶1個嫩芽,40d后統計其增殖率。

表2 增殖培養基不同激素濃度配比表 mg·L-1




1.6 生根培養試驗

剪取3 cm以上的健壯增殖芽,接種到以1/2 MS為基本培養基,添加不同質量濃度的激素(NAA、IBA)配制的4個配方的生根培養基上(表3)進行生根培養。每個處理接種10瓶,每瓶接種5株試管苗。接種30d后統計生根率及根長。

表3 生根培養基不同激素濃度配比表 mg·L-1


2 結果與分析

2.1 誘導培養基的選擇

表4 不同誘導培養基組合對黑枸杞腋芽誘導的影響


2.3 生根培養基的選擇

黑枸杞組培苗接入生根培養基約15d后芽基部開始有白色根長出,30d后統計生根率。每株組培苗的所有根總長超過2.0cm,即為合格生根苗。理想的生根苗應有超過3條根,每條根長度在1.0cm以上,3.0cm以下,過長則移栽過程中易斷裂,進而影響移栽成活率。從下表6可以看出,兩種激素配合使用具有協同作用,不但生根率高,而且單株組培苗的生根數量也多。因此黑枸杞適生根培養基配方為1/2MS+NAA 0.2mg/L +IBA 0.6mg/L。

表6 不同生長素配比對黑枸杞組培苗生根的影響


3 結論

以黑枸杞當年生枝條腋芽為外植體,研究了外植體誘導、增殖及生根階段的佳培養條件。通過研究,找出了黑枸杞組培育苗各個過程的佳培養基配方,使黑枸杞組培苗外植體的誘導率達到了78%,有效芽增殖倍數可達到6.32倍,生根率達到92%以上。形成了較為完備的組培工廠化育苗技術,為黑枸杞良種苗木的大規模工廠化生產奠定了技術基礎。